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分析人elisa檢測(cè)試劑盒的組成以及操作過(guò)程

發(fā)布時(shí)間:2019-12-26   點(diǎn)擊次數(shù):1586次
   人elisa檢測(cè)試劑盒試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。人elisa檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類(lèi)戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)。
 
  人elisa檢測(cè)試劑盒組成:
  1、30倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶
  2、酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品(320μg/L)0.5ml×1瓶
  3、酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶
  4、樣品稀釋液6ml×1瓶10說(shuō)明書(shū)1份
  5、顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張
  6、顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個(gè)
 
  人elisa檢測(cè)試劑盒的操作過(guò)程:
  1、運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時(shí)參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
  2、依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來(lái)定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
  3、參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育1小時(shí)。
  4、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
  5、每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育30分鐘。
  6、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
  7、每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
  8、取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
  9、在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。