雞elisa檢測試劑盒是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。雞elisa檢測試劑盒適用于體外定性檢測雞血清中的抗體ELISA檢測。
實(shí)驗(yàn)原理:
用純化的MT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的MT抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng) 過*洗滌后用底物(TMB)顯色。
1、細(xì)胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
2、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
3、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
4、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。
5、保存:如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
貯藏時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn):
1、樣品不能太稀,必須濃縮到一定濃度才能封裝貯藏,樣品太稀易降解、變性。
2、一般需加入防腐劑和穩(wěn)定劑,酶常用的穩(wěn)定劑有硫酸銨糊、蔗糖、甘油等,也可加入底物和輔酶以提高其穩(wěn)定性。此外,鈣、鋅、硼酸等溶液對某些酶也有一定保護(hù)作用。
3、貯藏溫度要求低,避免反復(fù)凍融。